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使用二氧化碳培养箱的好处

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二氧化碳培养箱是一种体外培养细胞/组织的设备。它模拟并形成与生物体中细胞/组织相似的生长环境,如稳定的温度、稳定的CO2水平、恒定的pH值和高相对饱和湿度。它广泛应用于细胞和组织培养以及一些特殊微生物的培养。在细胞动力学研究领域,收集哺乳动物细胞分泌物,各种物理和化学因素的致癌或毒理学效应,抗原的研究和生产,杂交瘤细胞的培养,抗体的生产,体外受精,干细胞,组织工程,药物筛选等。

在体内,生物体有自己的免疫系统来保护细胞或组织,但在体外培养时没有免疫屏障来保护自己。对于二氧化碳培养箱的基本参数,温度、CO2和湿度,大多数培养箱都能满足研究和实验的需要。然而,对于培养过程中的各种污染源,不同品牌的二氧化碳培养箱的控制方法和效果不同。因此,体外细胞培养的最大威胁实际上是污染。

二氧化碳培养箱的主要污染源是细菌、真菌(霉菌和酵母)、病毒、支原体和异质细胞。对于细胞来说,非常理想的培养环境也适合这些污染源的生存。孵化器本身不会被识别。细胞放置在培养箱中的大部分时间是在细胞培养中。因此,培养箱能否抑制细菌或杀菌是非常重要的!

细菌:细菌污染后,经过1-2天的培养会变得浑浊和黄色,这对细胞生长有显著影响。被污染的细胞很快与其他细胞系分离,并在消毒后丢弃。用实验室消毒剂对培养器皿和超净化合物进行消毒。

病毒:由于其寄生生存能力,疫情爆发后应尽快从正常细胞中分离病毒,并进行多年治疗。它比水更容易处理,病毒污染对运营商构成巨大威胁;尽管被病毒污染的细胞不会影响原代培养,但生产疫苗并不安全。潜在的病毒污染是大规模生产细胞和生产疫苗和干扰素等生物制品的难题。

真菌(霉菌、酵母):真菌污染后,培养基仍然浑浊,不像细菌污染那样容易被发现。真菌污染是细胞培养中最常见的污染;污染后的细胞生长相对缓慢,目前还没有很好的抑制方法,包括现在常用的两性碳。一旦污染爆发,很容易反复爆发,尤其是孢子很难杀死。

支原体:支原体污染细胞后不会导致细胞死亡,可以与细胞长期共存。介质通常不浑浊。在大多数情况下,细胞的病理变化是轻微的或微不足道的。轻微的变化也可以减轻由于通道和流体引起的变化。它给人一种正常的外观,但通常被大多数实验者忽视。事实上,这些细胞在许多方面都受到了潜在的影响,例如引起细胞变形、影响DNA合成和抑制细胞生长。

异质细胞:即细胞的交叉污染。在细胞培养过程中,由于每个细胞系所需的设备和溶液没有严格分离,一个细胞经常被另一个细胞污染。目前,世界上已有数十个细胞被HeLa细胞污染,导致许多实验无效。细胞交叉污染比人们想象的严重得多。

因此,一旦发生上述污染,最终培养的细胞只能丢弃,不能在实验中保存。对于许多难以取样的实验,损失无法估计。目前,二氧化碳培养箱的无污染控制技术主要有:干热、湿热、紫外线灯照射、HEPA过滤、消毒剂擦拭等。

山东顺盈服务生物科技有限公司

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