二氧化碳培养箱无污染控制技术

2022/04/06 分类:技术知识新闻中心 230 0

二氧化碳培养箱是一种体外培养细胞/组织的设备，它模拟并形成一个类似于生物体中细胞/组织的生长环境，如稳定的温度、稳定的C02水平、恒定的pH值和较高的相对饱和湿度。广泛应用于细胞、组织培养和一些特殊微生物的培养。在细胞动力学的研究领域，哺乳动物细胞分泌物的收集，各种物理和化学因素的致癌或毒理学效应，抗原的研究和生产，杂交瘤细胞的培养，抗体的生产，体外受精，干细胞，组织工程，药物筛选等等。

在体内，生物体有自己的免疫系统来保护细胞或组织，但在体外培养时却没有免疫屏障来保护自己。对于二氧化碳培养箱的基本参数，温度、CO2和湿度，大多数培养箱都能满足研究和实验的需要。但是，对于培养过程中的各种污染源，不同品牌的双氧培养箱的控制方法和效果是不同的。因此，细胞体外培养的最大威胁实际上是污染。

二氧化碳培养箱的主要污染源是细菌、真菌(霉菌和酵母)、病毒、支原体和异质细胞。

对于细胞来说，一个非常理想的培养环境也适合这些污染源的生存。培养箱本身不会被识别，细胞放置在培养箱的大部分时间都是在细胞培养中。因此，培养箱是否能抑制细菌或灭菌是非常重要的!

细菌：细菌污染后，培养1-2天就会变得浑浊发黄，对细胞生长有明显的影响。将被污染的细胞迅速从其他细胞系中分离出来，消毒后丢弃，培养用具和超净化合物用实验室消毒剂消毒。

病毒：由于该病毒具有寄生生存能力，疫情爆发后应尽快从正常细胞中分离出来，多年治疗。比水容易处理，病毒污染对操作者构成巨大威胁;虽然被病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。潜在的病毒污染是细胞大规模生产和疫苗、干扰素等生物产品生产中的一个难题。

真菌(霉菌、酵母菌)：真菌污染后，培养基保持浑浊，不像细菌污染那样容易被发现。真菌污染是细胞培养中最常见的污染;污染后细胞生长相对缓慢，目前还没有好的抑制方法，包括现在常用的两性碳。污染一旦爆发就容易反复爆发，尤其是孢子难以杀灭。

支原体：支原体污染细胞后，不会引起细胞死亡，可长期与细胞共存。培养基一般不浑浊。在大多数情况下，细胞的病理改变是轻微或不显著的。细微的变化也可以减轻由于通道和流体的变化。它给人一种正常的外观感觉，但经常被大多数实验者忽略。事实上，这些细胞已经在很多方面受到了潜在的影响，如引起细胞变形、影响DNA合成、抑制细胞生长等。

异质细胞：即细胞交叉污染。在细胞培养过程中，由于每个细胞系所需的设备和溶液没有严格分离，一个细胞经常被另一个细胞污染。目前，世界上已有数十个细胞被HeLa细胞污染，导致许多实验无效。细胞交叉污染比人们想象的要严重得多。

因此，一旦出现上述污染，最终培养的细胞只能丢弃，实验无法保存。对于许多取样困难的实验，损失是无法估计的。目前，二氧化碳培养箱的无公害控制技术主要有:干热、湿热、紫外线灯照射、HEPA过滤、消毒剂擦拭等。

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